تقيم السائل المنوي
(د. محمد ربيع المرستاني)
يشترط بالقائم بعملية التقيم أن يكون ذو خبرة ودراية بمكونات السائل المنوي وأن يعرف الشروط البيئية المناسبة لعملية التقيم أي درجة حرارة الأجهزة المستخدمة وحرارة الغرفة التي تجري فيها التقيم أي تكون الأدوات بدرجة حرارة تتراوح مابين 32ه - 38ه وحرارة الغرفة بحدود 20ه درجة مئوية وأن تكون الأدوات المستخدمة معقمة ونظيفة ويجب حفظ العينة أثناء الفحص بمكان تتوفر فيه الشروط المناسبة.
عملية تقيم السائل المنوي تتوقف على عدة بنود:
1 - حجم السائل المنوي.
2 - لون السائل المنوي.
3 - التركيز الهيدروجيني pH والحالة الصحية للسائل المنوي.
4 - حركية الحيوانات المنوية.
5 - تركيز الحيوانات المنوية.
6 - نسبة الحيوانات المنوية الحية إلى الميتة.
7 - حيوية الحيوانات المنوية.
8 - أشكال الحيوانات المنوية.
9 - الفحص البكتريولوجي أو الفيروسي.
10- حساب الكمية الكلية للأشياء الصلبة في السائل المنوي.
1- حجم السائل المنوي
يختلف حجم السائل المنوي من حيوان إلى آخر ومن نوع إلى آخر وللثور نفسه من فتره إلى أخرى حيث يتوقف الحجم على الحالة النفسية للنور أثناء الجمع وكذلك إلى طريقة الجمع والى خيرة القائم بعملية الجمع وكذلك عدد مرات الجمع وعمر الحيوان وتغذيته والحالة الجوية المحيطة بالحيوان وكذلك درجة حرارة المهبل وكذلك الحالة الصحية للثور وكذلك عدد مرات التحضير أو التهيج فوسطيا يعطي الثور مابين - 12 سم3 ففي الحيوانات الصغيرة يكون أقل وكذلك في الحيوانات المستخدمة كثيرا وفي حالات الالتهابات بالمجاري التناسلية يكون الحجم قليلا وكذلك فان الحيوانات المخصصة لإنتاج الحليب تعطي أكثر حجما من المخصصة لإنتاج اللحم وان الحجم ليس له علاقة بخصوبة الثور أو عقمه.
2- اللون
إن السائل المنوي للثيران يتشكل 15% من حيوانات منوية ولباقي بلازما السائل المنوي فالكثافة هذه يمكن أن تعطي السائل المنوي ألوان مختلفة وذلك تبعا لزيادة الكثافة ويتراوح اللون من مائي قليل الكثافة إلى حليبي تكون كثافة الحيوانات المنوية فيه أكثر من المائي وكريمي خفيف أو كريمي معتم تكون الكثافة فيه عالية.
أما التغيرات التي يمكن مشاهدتها في السائل المنوي فمثلا السائل المنوي الضارب إلى البني المحمر ويمكن أن يكون في السائل المنوي كريات دموية حمراء نتيجة للخشونة أثناء الجمع بالمهبل أو نتيجة التهاب في الخصية وأحيانا يمكن أن نرى خثرات من الألبومين وهذا دلالة على وجود التهاب الغدة المنوية وقد يكون اللون اصفر غامق وهذا نتيجة إفراز حمض الليمون وفيتامين ب2 بكثرة من الغدد الملحقة وقد يعطي لونا بنيا مسود وهذا دليل على تلونه بالغبار أو يكون مخضرا فهذا ملوث بالروث أو يعطي لونا حديديا يعني وجود الحديد في السائل المنوي وبالمختصر (سائل محمر) مدمى سائل أخضر فيه (روث) سائل اصفر (حديد) رمادي (غبار).
3- درجة الـ pH الحموضة (التركيز الهيدروجني)
من البحوث المجراة على الكشف عن قدرة الخصوبة للسائل المنوي بطريقة pH لم تكن مجدية فمن العملي أن درجة pH في السائل المنوي الطبيعي في الثيران معتدلا تقريبا أي يتراوح من (6.2 - 6.7) ويمكن ملاحظة تغيرات في درجة pH في الحالات التالية:
1- في حالات الثيران المستخدمة كثيرا في الجمع يمكن أن تصل إلى أكثر من 7 pH
2- إذا كانت القذفة غير كاملة يمكن ملاحظة أن درجة pH مرتفعة عن الطبيعي.
3- في حال وجود التهاب في الخصيتين أو البربخ والأمبولة أو الغدة المنوية فيتغير درجة pH عن الطبيعي
ولحساب درجة الـ pH هناك عدة طرق لكشفها:
1- هناك أجهزة خاصة الكترونية يمكن قياس درجة الـ pH في السائل المنوي وذلك بوضع طرف الجهاز في السائل المنوي فيظهر على الشاشة قراءة تدل على درجة الـ pH في السائل المنوي.
2- طريقة استخدام ورق كشف الحموضة وفي هذه الحالة يمكن أخذ نقطة من السائل المنوي ووضعها على ورقة عباد الشمس فيتغير لونها ويمكن مقارنة اللون الظاهر بمقياس الألوان ومنه نستدل على درجة الـ pH
أما في حال ترك السائل المنوي لفترة من الزمن فانه يصبح حمضي وذلك لعدة أسباب منها:
1- إن تركيز الحيوانات المنوية في الثيران عال.
2- يحتوي السائل المنوي على كمية عالية من الفركتوز.
3- وجود نسبة قليلة من كربونات الصوديوم.
ولا يوجد علاقة وثيقة مابين الحموضة والخصوبة.
4- تركيز الحيوانات المنوية
ويعني عدد الحيوانات المنوية الموجودة في 1 مم3 وهناك عدة طرق يمكن استخدامها في حساب عدد الحيوانــات المنـوية ويمكـن استخــدام مقيــاس اللــون الطيفــي الكهربــائي Photoelctric calorimetre 2- أو مقياس عداد الكريات الحمراء Haemocytometer ويمكن الانتباه الى أن طريقة جمع السائل المنوي لها دور في زيادة عدد الحيوانات المنوية فبالطريقة الكهربائية يكون التركيز أقل من المهبل الاصطناعي وان عدد الحيوانات المنوية في السائل المراد تجميده يجب أن لا تقل عن 60 مليون بالملمتر.
5- حركية الحيوانات المنوية
يجب التحري عن الحركية مباشرة بعد الجمع وذلك لمعرفة جودة السائل المنوي ويجب الانتباه إلى عدة أمور أثناء الفحص 1- درجة الحراره للغرفه يجب أن تكون معتدلة (20ه) - أن نوفر لهم مائي درجة حرارته تتراوح مابين (32ه - 38ه). يجب أن تكون الأدوات المستخدمة معقمة وحرارتها مناسبة للعمل وأن تكون نظيفة من المواد الكيميائية.
يمكن أن تكون القذفة الأولى من ثور مرتاح لمدة طويلة فهي تحتوي على نسبة عالية من الحيوانات المنوية الميتة ويفضل عند الفحص استخدام الشرائح المعقمة والنظيفة والمسخنة .
ولتقدير الحركية يمكن إتباع الطريقة التالية:
نأخذ جزء بسيط من السائل المنوي ونضيفه إلى أنبوبة معقمة وتحتوي على محلول فيزيلوجي 0.9% كلور الصوديوم أو سترات الصوديوم (2.
ثم نقوم وبهدوء عملية مزج السائل ومن ثم نأخذ ثلاث نقاط على الشريحة صغيرة - متوسطة - كبيرة وأثناء الفحص تحت المجهر يجب مراقبة الحيوانات المنوية ذات الحركة الأمامية السريعة وكذلك إلى نسبة الحيوانات المنوية الميتة وكذلك الحيوانات المنوية الغير ناضجة والحيوانات المنوية المشوهة.
وكذلك يجب الانتباه إلى عدم حصول صدمة للسائل المنوي وهناك بعض الأمراض التي تصيب الحيوان تخفف وتضعف الحركية منها ضمور الخصية أو استحالتها أو التهابات المجاري البولية التناسلية.
6- نسبة الحيوانات المنوية الحية والميتة
لكشف الحيوانات المنوية الميتة يجب استخدام صبغات خاصة وذلك لأن الحيوان الميت هو الذي يأخذ الصبغة وذلك لأن غلاف الخلية الميت يفقد خاصية لعدم نفوذ الصبغة وبالتالي تتلون هذه الخلية أما الخلايا الحية فهي ترفض الصبغة ويمكن مشاهدة اللون الأبيض والصبغة هي 3 غ سترات الصوديوم + 100 سم3 ماء مقطر + 1 غ ايوسين + 5 غ بتكروسين نأخذ نقطة من السائل المنوي ونضيف نقطة من الصبغة ثم نفردها على الشريحة ونجففها على لهب وأثناء الفحص نعد 200 حيوان منوي ويجب أن لا تزيد نسبة الحيوانات المنوية الميتة عن 20% وفي هذه الحالة يجب الانتباه إلى أن الثور مرتاح لفترة طويلة ففي هذه الحالة تزيد نسبة الحيوانات الميتة.
7- حيوية الحيوانات المنوية
وتعني مدى نشاط عملية الاستقلاب والتنفس في الحيوانات المنوية بالسائل.
8- شكل الحيوانات المنوية
ويمكن التعرف عليها وذلك بأن تقوم بأخذ قلم على شريحة من السائل المنوي الطازج ونتركه يجف ثم نقوم بصبغ هذا القلم بصبغة الآيوزين أو صبغة رايت ويمكن أن نقوم بصبغة سريعة وهي وضع الحز على الشريحة ويمكن التعرف على الحيوانات المنوية المشوة.
9- أنواع الشذوذات في الحيوانات المنوية
1- شذوذات الرأس وتشمل صغر في الرأس - كبر الرأس - ازدواجية الرأس - الرأس الكمثري - الرأس المدور المقطوع - انفصال قبعة الرأس.
2- شذوذات القطعة المتوسطة:
1- انتفاخ الرقبة - التفاف القطعة المتوسطة والذنب حول الرأس - انحراف الاتصال بين الرقبة والقطعة الوسطى بالنسبة للرأس - ازدواجية القطعة الوسطى - التفاف القطعة الوسطى - انفصال القطعة الوسطى والذنب - وجود النقطة البروتوبلازمية على القطعة المتوسطة - اعوجاج القطعة الوسطى.
3- شذوذات الذنب
الذنب الملتف - ازدواجية الذنب - انعدام أو قصر الذيل - اعوجاج الذنب - كسر الذيل.
(د. محمد ربيع المرستاني)
يشترط بالقائم بعملية التقيم أن يكون ذو خبرة ودراية بمكونات السائل المنوي وأن يعرف الشروط البيئية المناسبة لعملية التقيم أي درجة حرارة الأجهزة المستخدمة وحرارة الغرفة التي تجري فيها التقيم أي تكون الأدوات بدرجة حرارة تتراوح مابين 32ه - 38ه وحرارة الغرفة بحدود 20ه درجة مئوية وأن تكون الأدوات المستخدمة معقمة ونظيفة ويجب حفظ العينة أثناء الفحص بمكان تتوفر فيه الشروط المناسبة.
عملية تقيم السائل المنوي تتوقف على عدة بنود:
1 - حجم السائل المنوي.
2 - لون السائل المنوي.
3 - التركيز الهيدروجيني pH والحالة الصحية للسائل المنوي.
4 - حركية الحيوانات المنوية.
5 - تركيز الحيوانات المنوية.
6 - نسبة الحيوانات المنوية الحية إلى الميتة.
7 - حيوية الحيوانات المنوية.
8 - أشكال الحيوانات المنوية.
9 - الفحص البكتريولوجي أو الفيروسي.
10- حساب الكمية الكلية للأشياء الصلبة في السائل المنوي.
1- حجم السائل المنوي
يختلف حجم السائل المنوي من حيوان إلى آخر ومن نوع إلى آخر وللثور نفسه من فتره إلى أخرى حيث يتوقف الحجم على الحالة النفسية للنور أثناء الجمع وكذلك إلى طريقة الجمع والى خيرة القائم بعملية الجمع وكذلك عدد مرات الجمع وعمر الحيوان وتغذيته والحالة الجوية المحيطة بالحيوان وكذلك درجة حرارة المهبل وكذلك الحالة الصحية للثور وكذلك عدد مرات التحضير أو التهيج فوسطيا يعطي الثور مابين - 12 سم3 ففي الحيوانات الصغيرة يكون أقل وكذلك في الحيوانات المستخدمة كثيرا وفي حالات الالتهابات بالمجاري التناسلية يكون الحجم قليلا وكذلك فان الحيوانات المخصصة لإنتاج الحليب تعطي أكثر حجما من المخصصة لإنتاج اللحم وان الحجم ليس له علاقة بخصوبة الثور أو عقمه.
2- اللون
إن السائل المنوي للثيران يتشكل 15% من حيوانات منوية ولباقي بلازما السائل المنوي فالكثافة هذه يمكن أن تعطي السائل المنوي ألوان مختلفة وذلك تبعا لزيادة الكثافة ويتراوح اللون من مائي قليل الكثافة إلى حليبي تكون كثافة الحيوانات المنوية فيه أكثر من المائي وكريمي خفيف أو كريمي معتم تكون الكثافة فيه عالية.
أما التغيرات التي يمكن مشاهدتها في السائل المنوي فمثلا السائل المنوي الضارب إلى البني المحمر ويمكن أن يكون في السائل المنوي كريات دموية حمراء نتيجة للخشونة أثناء الجمع بالمهبل أو نتيجة التهاب في الخصية وأحيانا يمكن أن نرى خثرات من الألبومين وهذا دلالة على وجود التهاب الغدة المنوية وقد يكون اللون اصفر غامق وهذا نتيجة إفراز حمض الليمون وفيتامين ب2 بكثرة من الغدد الملحقة وقد يعطي لونا بنيا مسود وهذا دليل على تلونه بالغبار أو يكون مخضرا فهذا ملوث بالروث أو يعطي لونا حديديا يعني وجود الحديد في السائل المنوي وبالمختصر (سائل محمر) مدمى سائل أخضر فيه (روث) سائل اصفر (حديد) رمادي (غبار).
3- درجة الـ pH الحموضة (التركيز الهيدروجني)
من البحوث المجراة على الكشف عن قدرة الخصوبة للسائل المنوي بطريقة pH لم تكن مجدية فمن العملي أن درجة pH في السائل المنوي الطبيعي في الثيران معتدلا تقريبا أي يتراوح من (6.2 - 6.7) ويمكن ملاحظة تغيرات في درجة pH في الحالات التالية:
1- في حالات الثيران المستخدمة كثيرا في الجمع يمكن أن تصل إلى أكثر من 7 pH
2- إذا كانت القذفة غير كاملة يمكن ملاحظة أن درجة pH مرتفعة عن الطبيعي.
3- في حال وجود التهاب في الخصيتين أو البربخ والأمبولة أو الغدة المنوية فيتغير درجة pH عن الطبيعي
ولحساب درجة الـ pH هناك عدة طرق لكشفها:
1- هناك أجهزة خاصة الكترونية يمكن قياس درجة الـ pH في السائل المنوي وذلك بوضع طرف الجهاز في السائل المنوي فيظهر على الشاشة قراءة تدل على درجة الـ pH في السائل المنوي.
2- طريقة استخدام ورق كشف الحموضة وفي هذه الحالة يمكن أخذ نقطة من السائل المنوي ووضعها على ورقة عباد الشمس فيتغير لونها ويمكن مقارنة اللون الظاهر بمقياس الألوان ومنه نستدل على درجة الـ pH
أما في حال ترك السائل المنوي لفترة من الزمن فانه يصبح حمضي وذلك لعدة أسباب منها:
1- إن تركيز الحيوانات المنوية في الثيران عال.
2- يحتوي السائل المنوي على كمية عالية من الفركتوز.
3- وجود نسبة قليلة من كربونات الصوديوم.
ولا يوجد علاقة وثيقة مابين الحموضة والخصوبة.
4- تركيز الحيوانات المنوية
ويعني عدد الحيوانات المنوية الموجودة في 1 مم3 وهناك عدة طرق يمكن استخدامها في حساب عدد الحيوانــات المنـوية ويمكـن استخــدام مقيــاس اللــون الطيفــي الكهربــائي Photoelctric calorimetre 2- أو مقياس عداد الكريات الحمراء Haemocytometer ويمكن الانتباه الى أن طريقة جمع السائل المنوي لها دور في زيادة عدد الحيوانات المنوية فبالطريقة الكهربائية يكون التركيز أقل من المهبل الاصطناعي وان عدد الحيوانات المنوية في السائل المراد تجميده يجب أن لا تقل عن 60 مليون بالملمتر.
5- حركية الحيوانات المنوية
يجب التحري عن الحركية مباشرة بعد الجمع وذلك لمعرفة جودة السائل المنوي ويجب الانتباه إلى عدة أمور أثناء الفحص 1- درجة الحراره للغرفه يجب أن تكون معتدلة (20ه) - أن نوفر لهم مائي درجة حرارته تتراوح مابين (32ه - 38ه). يجب أن تكون الأدوات المستخدمة معقمة وحرارتها مناسبة للعمل وأن تكون نظيفة من المواد الكيميائية.
يمكن أن تكون القذفة الأولى من ثور مرتاح لمدة طويلة فهي تحتوي على نسبة عالية من الحيوانات المنوية الميتة ويفضل عند الفحص استخدام الشرائح المعقمة والنظيفة والمسخنة .
ولتقدير الحركية يمكن إتباع الطريقة التالية:
نأخذ جزء بسيط من السائل المنوي ونضيفه إلى أنبوبة معقمة وتحتوي على محلول فيزيلوجي 0.9% كلور الصوديوم أو سترات الصوديوم (2.
ثم نقوم وبهدوء عملية مزج السائل ومن ثم نأخذ ثلاث نقاط على الشريحة صغيرة - متوسطة - كبيرة وأثناء الفحص تحت المجهر يجب مراقبة الحيوانات المنوية ذات الحركة الأمامية السريعة وكذلك إلى نسبة الحيوانات المنوية الميتة وكذلك الحيوانات المنوية الغير ناضجة والحيوانات المنوية المشوهة.وكذلك يجب الانتباه إلى عدم حصول صدمة للسائل المنوي وهناك بعض الأمراض التي تصيب الحيوان تخفف وتضعف الحركية منها ضمور الخصية أو استحالتها أو التهابات المجاري البولية التناسلية.
6- نسبة الحيوانات المنوية الحية والميتة
لكشف الحيوانات المنوية الميتة يجب استخدام صبغات خاصة وذلك لأن الحيوان الميت هو الذي يأخذ الصبغة وذلك لأن غلاف الخلية الميت يفقد خاصية لعدم نفوذ الصبغة وبالتالي تتلون هذه الخلية أما الخلايا الحية فهي ترفض الصبغة ويمكن مشاهدة اللون الأبيض والصبغة هي 3 غ سترات الصوديوم + 100 سم3 ماء مقطر + 1 غ ايوسين + 5 غ بتكروسين نأخذ نقطة من السائل المنوي ونضيف نقطة من الصبغة ثم نفردها على الشريحة ونجففها على لهب وأثناء الفحص نعد 200 حيوان منوي ويجب أن لا تزيد نسبة الحيوانات المنوية الميتة عن 20% وفي هذه الحالة يجب الانتباه إلى أن الثور مرتاح لفترة طويلة ففي هذه الحالة تزيد نسبة الحيوانات الميتة.
7- حيوية الحيوانات المنوية
وتعني مدى نشاط عملية الاستقلاب والتنفس في الحيوانات المنوية بالسائل.
8- شكل الحيوانات المنوية
ويمكن التعرف عليها وذلك بأن تقوم بأخذ قلم على شريحة من السائل المنوي الطازج ونتركه يجف ثم نقوم بصبغ هذا القلم بصبغة الآيوزين أو صبغة رايت ويمكن أن نقوم بصبغة سريعة وهي وضع الحز على الشريحة ويمكن التعرف على الحيوانات المنوية المشوة.
9- أنواع الشذوذات في الحيوانات المنوية
1- شذوذات الرأس وتشمل صغر في الرأس - كبر الرأس - ازدواجية الرأس - الرأس الكمثري - الرأس المدور المقطوع - انفصال قبعة الرأس.
2- شذوذات القطعة المتوسطة:
1- انتفاخ الرقبة - التفاف القطعة المتوسطة والذنب حول الرأس - انحراف الاتصال بين الرقبة والقطعة الوسطى بالنسبة للرأس - ازدواجية القطعة الوسطى - التفاف القطعة الوسطى - انفصال القطعة الوسطى والذنب - وجود النقطة البروتوبلازمية على القطعة المتوسطة - اعوجاج القطعة الوسطى.
3- شذوذات الذنب
الذنب الملتف - ازدواجية الذنب - انعدام أو قصر الذيل - اعوجاج الذنب - كسر الذيل.